His标签蛋白纯化试剂盒

His标签蛋白纯化试剂盒

产品概述product description

标签蛋白纯化试剂盒提供全套试剂,适用于从各种样品中纯化带有6*His标签的

蛋白。本试剂盒填料支持物为CL 6B琼脂糖凝胶,载量为20mg His标签蛋白/ml填料。本试剂盒包含Ni-

Agarose填料、亲和柱空柱以及可溶性His融合蛋白纯化所需的全部试剂(细菌裂解液、蛋白酶抑制剂混

合物、结合缓冲液和洗脱缓冲液组分) ,使用方便。该镍柱纯化系统对6xHis- tag蛋白具有显著特异吸附

能力，能够高效-步纯化带有6个组氨酸亲和标签的蛋白。该系统具有4个Ni2+螯合位点,较只有3个螯合

位点的Ni-IDA结合Ni2+更为牢固,有效防止纯化过程中Ni2 +脱落且增强对His标签蛋白的结合能力,提

高纯化效率。较高的基团密度,大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下，对来源于各种表达系

统(如杆状病毒,哺乳细胞，酵母以及细菌)中的His标签蛋白,均有很好的纯化效果。本产品已螯合镍

离子，可直接用可溶性蛋白的纯化,使用方便，快捷。使用pH为3-13的范围内都能有好的纯化效果, pH2

和pH14的条件下也可以短期使用。填料可重复使用。

保存温度

2-8C

注意事项

1.蛋白酶抑制剂-20°C保存;

2.其他2-8°C保存; 避免冷冻。

有效期

仪器准备

1.离心机

2.振荡器

3.涡旋混匀器

4.移液器

5.冰箱

6.冰盒

试剂准备

纯

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.-次性手套

使用注意事项

1.在纯化之前采用电泳检测蛋白的可溶性,本试剂盒只适合于可溶性蛋白的纯化,如需纯化包涵体蛋白，请选择我公司的

其他货号的包涵体蛋白纯化试剂盒。

2.样品中不能含有郁-巯基乙醇、DTT和EDTA、 EGTA等。

使用方法

用于纯化可溶性蛋白

常见问题分析

1.His标签蛋白纯化过程,经常出现的问题包括几个方面:

纯化的组分中没有His标签的蛋白?

His标签 蛋白洗脱后杂带较多?

我们可以根据检测上柱前蛋白，流穿液蛋白，和洗脱液蛋白的检测，来进行基本的判断。是否包涵体蛋白?是否标签没有

表达出来:可能是因为折叠构象不正确导致标签在重折叠时没有位于蛋白质分子的表面上无法与离子柱结合:或者标签在

折叠时没有位于蛋白质分子的表面上;蛋白不溶解或沉淀在柱子上:要留意缓冲液体的pH,此外在样品中添加-些表面

活性剂甚至Z醇等有机溶剂可以增加疏水性蛋白的溶解度,对于带半胱氨酸多的蛋白很容易氧化聚集沉淀,所以需要加2-

5mM巯基乙醇避免沉淀。