细胞内pH值检测试剂盒（绿色荧光）

细胞内pH值检测试剂盒（绿色荧光）

产品概述product description

细胞内pH (Intracellular pH, pHi) 是酶活性和细胞功能的重要生理决定因素，所有蛋白质都依赖于严格调节的pH值以维持其结构和功能。质子-去质子化可以指示生物表面的电荷,并且是许多代谢反应中的组成部分。此外,跨线粒体膜的质子梯度用于产生细胞能量并支持其他线粒体过程。因此,细胞已经开发出

多种机制来保持pHi的窄范围，，以响应pH值的细胞内和细胞外波动。细胞内pH值检测试剂盒采用BBellProbe⑧P05细胞内pH值荧光探针检测胞内pH值的变化。TM P05是pH敏感的荧光染料,其在碱性条件下荧光强更高,反之酸性条件下变低，从而TM P05可被用于监测细胞内pH变化，见图-。可以穿透细胞膜的荧光染料,本身没有荧光，穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成荧光物质,从而被滞留在细胞内。产生的荧光物质最大激发波长为502nm,最大发射波长为528nm,其在不同的pH值条件下发射的荧光强度不同，从而可以反映细胞内pH值得变化情况。

保存温度

2-8°C避光

注意事项

1.探针长期不用可以-20°C保存。避免反复冻融。

2.探针A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离

心至管底部再开盖。

有效期

6个月.

检测方法

流式细胞仪/荧光酶标仪/光度计/激光共聚焦/荧光显微镜

适用样本

细胞

产品应用

流式细胞仪/荧光酶标仪/光度计/激光共聚焦荧光显微镜

仪器准备

1.流式细胞仪或荧光酶标仪或光度计或激光共聚焦或荧光显微镜

2.离心机

4.冰箱

5.冰盒.

试剂准备

1.PBS缓冲液2.HBSS 3. (备选) Nigericin sodium salt (相关产品BB-94002)

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.- -次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体酒落。使用前，先将

本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。

2.pH探针为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也

需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

使用方法

1.染色工作液的配制:

根据样品数，用探针稀释液将P05探针进行10倍稀释，然后再用HBSS缓冲液稀释 BBellProbe⑧P05溶液20倍-200

倍,配制成BellProbe⑧P05染色工作液。

2. 将BBellProbe⑧P05染色工作液加入已处理好的细胞，在37°C孵育30-60 分钟。

3.用PBS或HBSS洗涤细胞2-3次。用HBSS重悬细胞。

4.然后用该细胞进行荧光细胞内pH变化情况检测。

激发波长488-506nm,发射波长526-536nm。