细胞膜染色试剂盒（PKH67）

细胞膜染色试剂盒（PKH67）

产品概述product description

荧光染料PKH67是-种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞,

通过与膜结构的脂质分子结合而标记细胞。PKH67对细胞毒性较小, 荧光背景低,脂溶性高,能够轻易

穿透细胞膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH67标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使

邻近细胞染色的功能。在细胞分裂增殖过程中， PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记

荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性, 它可被用于检测

细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。PKH67标记细胞的荧光非常均- -,并且分裂后的子代细胞

的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中，PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度

变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞,分裂- -次(1/2的荧

光强度)，二次(1/4的荧光强度)，三次 (1/8的荧光强度)， 以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测

分裂次数多达六次甚至更多。除了用于细胞增殖检测，PKH67还可以用于细胞的体外盒体内示踪， 标记

后荧光在胞内表达稳定，阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分

化情况;或将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。

保存温度

-20°C避光

注意事项

1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。

2.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期

6个月

检测方法

荧光显微镜/激光共聚焦

适用样本

动物细胞

产品应用

荧光显微镜/激光共聚焦

仪器准备

1.流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液2.HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.-次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后:立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

使用方法

从冰箱中取出PKH67试剂,静置几分钟至室温，或者37°C水浴片刻后,离心盛放PKH67的管子 ，开盖前请务必离心几分

钟让试剂充分落入管底后才能开盖。

2.根据需要检测的细胞样品数，用稀释液将探针10倍稀释，再用合适的溶液(如:无血清培养基，HBSS或PBS) 将

PKH67母液25倍稀释,配制成染色工作液。

3.将制备好的待测细胞用100ul染色工作液重悬，至细胞浓度大约107/ml。

4.在2-8°C培养箱中孵育15-30分钟。

6.取500μl细胞悬液,用流式细胞仪检测。Ex/Em=490/502nm。

7.随后还可按照细胞的正常培养方法进行培养。

可以在荧光显微镜下直接观察标记效果,也可以在培养适当时间后再用流式细胞仪检测细胞增殖,或用于其他特定实验目

的的细胞荧光示踪。