Ca2+钙离子染色试剂盒

Ca2+钙离子染色试剂盒

产品概述product description 

细胞内钙离子染色试剂盒是利用F系列Ca2+钙离子荧光探针进行钙离子特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的F03细胞内钙离子染色探针为绿色荧光标记

的钙离子探针，具有505 / 525nm的最大激发/发射波长F03具有极高的细胞渗透性，经过简单孵育即可实现细胞加载。穿透细胞膜进入细胞后被细胞内的酯酶剪切形成不易透过细胞膜的F03新产物，从而被滞留在细胞内。F03游离配体几乎是非荧光性的，其英光不会随钙离子浓度升高而增

强。但是,当它与细胞内钙离子结合后可以产生较强的荧光,荧光会增加60至100倍, 被激发后可以发出绿色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。最大激发波长为505nm,最大发射波长为525nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为515 ~ 530nm。可以使用荧光显微镜、酶标

仪、激光共聚焦显微镜或流式细胞仪检测细胞内钙离子浓度的变化。F03荧光探针采用可见光激发,与传统的紫外光激发的荧光探针相比,仪器的适用范围更广泛,具有更强的探针吸收性能，使得更低浓度的探针即可成功检测Ca2: +变化，从而降低了对活细胞的光毒性,检测敏感度更高。

保存温度

-20°C避光

注意事项

1.探针染料短期2周内可以2-8°C保存。探针长期不用可以-20°C保存。避免反复冻融。

2.探针染色液A为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状

态后离心至管底部再开盖

有效期

6个月

检测方法

1.流式细胞仪

2.荧光显微镜

3.激光共聚焦

适用样本

1.悬浮细胞

产品应用

流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

仪器准备

1.激光共聚焦/荧光显微镜//光度计/流式细胞仪

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液2.HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.-次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。

2.探针染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。 注意需要加热溶解,吸头

也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

使用方法

1. 染色工作液的配制:

根据样本数量,用37°C培养箱预热的HBSS将BcellProbe⑧ F03荧光染料200-1000倍稀释,配制成染色工作液。

2. 细胞染色

悬浮细胞染色

1)用PBS洗涤细胞2次。

2)加入适量体积的染色工作液重悬细胞,使其密度大约为1 x106/mL。

3) 在37 °C孵育细胞20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均

-的标记结果。

4)加入5倍体积的含有1%胎牛血清的HBSS,再继续孵育40分钟。

5)孵育结束, 500 g离心5分钟。

6)弃上清液，再次缓慢加入37°C预热的HBSS重悬细胞。

7)重复(5)，(6) 步骤两次。

8)加入HBSS重悬细胞，在37°C 下再继续孵育20分钟。

9)然后用该细胞进行荧光钙离子检测。

贴壁细胞染色

1)用PBS洗涤细胞2次。

2)细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。

3) 37 °C 孵育细胞20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一

的标记结果。

4) 吸干染色工作液,用HBSS洗培养板或盖玻片2~ 3次,每次用预热的HBSS覆盖所有细胞，然后吸干培养基。

5) 加入HBSS,在37°C下再继续孵育20分钟。

6)然后用该细胞进行荧光钙离子检测。

3.用荧光显微镜 或流式细胞仪检测

激发波长为488nm，最大发射波长为525nm。