DAPI染色液

DAPI染色液

产品概述product description

DAPI染色试剂用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色，染色

后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。DAPI (diamidino-2-phenylindole)能与双链DNA小槽,特

别是AT碱基结合,也可插入少于3个连续AT碱基对的DNA序列中。当它与双链DNA结合时,荧光强度增

强20倍,而与单链DNA结合则无荧光增强现象,因此是一种简易、 快速和敏感地检测DNA的方法。DAPI

的荧光强度较Hoechst低，但荧光稳定性优于Hoechst; 其特异性较溴化乙啶和碘化丙啶高。

保存温度

2-8°C避光

注意事项

1.有效期为试剂盒末拆封前按要求条件保存的有效期。

2.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期

- -年

检测方法

流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

适用样本

动物细胞

产品应用

流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

仪器准备

1.流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

2.离心机

3.移液器

4.冰箱

5.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液2.HBSS

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.-次性手套.

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

使用方法

1.染艳工作液的配制:

根据样品数用PBS将DAPI染色液10-100倍稀释,配制成染色工作液。

2.细胞涂片的制备:

贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中,让培养细胞长于玻片上,然后用药物诱导细胞凋后取出,用4%多聚甲醛固定

5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。

对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，500-1000g离心5分钟收集细胞， PBS洗2次,收集调整细胞数为1X105/ml,

涂片或用离心涂片,用4%多聚甲醛固定5min;

3.用PBS洗涤涂片两次。

4.加适量染色工作液于涂片上,室温避光染色5-20分钟。

5.用荧光显微镜检测结果。染料-DNA复合物的最大激发波长为360nm,最大发射波长为454nm。

结果分析:

于荧光显微镜下用360nm激发光观察结果: DAPI染色呈蓝白色荧光。

早期凋亡细胞呈现核浓缩,染色加深，或核染色质呈新月形聚集于核膜一边; 晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆

形小体，并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。