内质网染色试剂盒（蓝色荧光）

内质网染色试剂盒（蓝色荧光）

产品概述product description

内质网染色试剂盒是利用E系列探针进行内质网特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的E01内质网染色探针为蓝色荧光标记的内质网探针，具有

373nm/430nm-640nm的激发/发射波长。E系列探针是一-种细胞渗透型的对活细胞中的内质网体进行选择性染色的- -类新型荧光染料,该系列探针可以选择性标记内质网。只需简单孵育细胞,即可穿过细胞膜并直接聚集在活性内质网上。可有效标记活细胞。- -旦内质网被染色后,还能根据后续实验的需求进行固定(醛类固定剂如甲醛)和透化(醛类去污剂如Triton X-100)，探针依然维持在细胞内。

保存温度

-20°C避光

注意事项

1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。

2.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期

6个月.

检测方法

荧光显微镜/激光共聚焦

适用样本

动物细胞

产品应用

荧光显微镜/激光共聚焦

仪器准备

1.流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

2.离心机

3.移液器

5.冰盒

试剂准备

1.PBS缓冲液2.HBSS

耗材准备

1.离心管

3.-次性手套

使用注意事项

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后:立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

使用方法

1、染色工作液配制:

根据样本数量，用染料稀释液将BBcellProbe⑧ E01荧光染料10倍稀释,再用HBSS缓冲液或者相应的培养基50-500倍稀

释(对于后续需要做固定或透化的样本, 20-100倍稀释) ,配制成染色工作液。

2、细胞染色

2.1 对于贴壁细胞

1)培养皿/培养板准备细胞样本。

2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,用HBSS缓冲液洗涤细胞,加入适量37°C预热的含探针工作液。于生长状态下

孵育15分钟~ 40分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。

3)利用新鲜培养基替换上述染色液。

4)荧光显微镜(含合适滤片)或激光共聚焦显微镜下观察。激发/发射波长为373 / 430 nm。使用DAPI滤光片或紫外长

波通(UV longpass)滤光片。

或者进行后续的固定和透化步骤。

2.2对于悬浮细胞

1)离心,吸除上清。

2)利用37°C预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育15分钟~ 40分钟(具体时间需根据细胞类型而定,需预实

验优化)

3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。

4)置于荧光镜下观察。或激光共聚焦显微镜检测。激发/发射波长为373 / 430 nm。使用DAPI滤光片或紫外长波通

(UV longpass)滤光片。

或者进行后续的固定和透化步骤。

3.固定和透化:

1)染色结束后,利用培养液或缓冲液清洗细胞;

2)小心吸走清洗液。换用新鲜配制且预热的含2-4%甲醛的缓冲液或培养液进行细胞固定。

3)清洗细胞:吸除固定液,用适当缓冲液冲洗细胞数次。

4)细胞透化(可选) :