外泌体（Exosomes）提取试剂盒-细胞培养上清4ml/T

外泌体（Exosomes）提取试剂盒-细胞培养上清4ml/T

产品概述product description

总外泌体(Exosomes) 提取试剂盒(细胞培养上清用)适用于从各种原代或传代培养细胞培养上清样品中提取总外泌体。不需要超速离心,仅需通过简单的常规离心即可从样本中获取大量结构完整的外泌体，具有快速简单，提取效率高的特点，可节省更多的实验时间和样本。提取的外

泌体可根据实验目的用于后续的多种实验，应用范围广 泛。外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的膜性小囊泡,直径约为30-150nm, 天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各种体液中，研究发现，Exosome内含有 与细胞来源相关的蛋白质、mRNA和microRNA, 并且exosome能够通

过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。外泌体囊泡已经成为细胞间通讯的重要介质，参与原核生物和高等真核生物细胞之间的生物信号传递,以调节不同范围的生物过程。外泌体囊泡的病理生理作用开始在包括癌症、感染性疾病和神经变性疾病在内的疾病中得到充分认识，显现了

外泌体作为疾病的早期诊断、治疗干预的潜在新靶点的巨大应用前景。此外, 未修饰和工程化的外泌体囊泡可能在大分子药物递送中具有应用价值。传统的体外培养的细胞中分离和提取exosome的主要方法是超速离心法，这种方法缺点是耗时耗力，往往需要30-70个小时， 每次最多只能处理6个样品，需要大量的

起始材料，而且产量不高。生物自主开发的外泌体快速提取试剂盒系列产品，可以通过简单离心快速高效获得高纯度外泌体颗粒。本试剂盒提取的外泌体完好无缺，能用于各种功能研究、蛋白分析及RNA分析、电镜分析、NTA粒径分析等下游实验应用。本试剂盒按每个样本处理4ml细胞培养.上清计,每

个50T试剂盒大约可以用于提取200m|细胞培养上清。如果需要处理大量的细胞培养上清，将提取液按细胞培养.上清体积的1: 4加入细胞培养.上清即可。还可以提供- -小时快速提取获得各种样本外泌体的快速提取试剂盒(相关产品: BB-3903)。

保存温度

2-8°C

注意事项

1.低温有沉淀析出的话可以在37°C短时间水浴溶解，摇匀后使用。

2.试剂拆封后请尽快使用完!

有效期

检测方法

外泌体研究

适用样本

细胞培养上清

产品特点

1.使用方便，无需超速离心，省时省力;

2.纯度高，富集大,应用范围广;

3.获取的Exosome结构和功能完整;

4.稳定性好，便于运输，便于保存。

产品应用

外泌体研究

仪器准备

1.离心机

2.移液器

3.冰箱

4.冰盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

3.- -次性手套

使用注意事项

1.不同细胞分泌的外泌体数量差异极大,请根据实际情况选择培养基样品的量,根据下游应用和参考文献确定。条件允许

的情况下采用尽可能多的细胞培养上清。

2.-般巨噬细胞、 淋巴细胞、造血细胞、胰腺癌细胞等分泌外泌体较多,其它细胞样本建议每个样培养基上清用量不少于

8 ml。常规的细胞样本最佳培养上清上样量为15-20 m|及以上,条件允许的情况下采用尽可能多的细胞培养上清。

3.条件允许的情况下可以将细胞培养上清浓缩后再提取外泌体。

使用方法

1.收集4ml待提取的培养基样品，置2-8°C保存。

2.将样品在4°C条件下，3000xg离心15分钟。 弃沉淀，收集上清。

3.小心将上清移入另-干净离心管中。

4.将样品在4°C条件下，10000xg离心20分钟。 弃沉淀，收集上清。

5.小心将上清移入另一干净离心管中。

6.在4 ml.上清中加入1 ml提取液A,盖紧离心管盖，上下颠倒混匀1分钟左右，使液体充分混匀。

7.置2-8C冰箱静置过夜。

8. 在4°C条件下, 10000xg离心60分钟。

9.小心移除上清,收集沉淀。

10.取50-100 u外泌体保存液将沉淀重悬,即得到外泌体样品。

11.将外泌体样本-80°C保存或直接用于下游应用。

常见问题分析

1.无外泌体血清培养基(或者无血清培养基)在什么时候使用?

细胞在正常含血清的培养基中培养-定的时间后, 细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基,换成新鲜的

无外泌体血清培养基(或者无血清培养基)，继续培养24-48 h,细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清，该上清液即

可用于提取外泌体。